培养基倾注温度的基本知识

1. 倾注温度

培养基的倾注适宜温度为约45℃。当培养基放在手心感觉不烫而在手背感到烫时，说明温度大约为45℃。如果温度过高，凝固时间将延长，并且皿盖上可能会产生大量冷凝水，这对后续实验会产生不利影响。而温度过低则可能导致培养基在倒盘过程中出现部分凝固现象。

2. 添加成分

在某些情况下，培养基需要添加额外成分。这些添加成分在加入前应放置至室温，以避免冷液体引起琼脂凝结或成片状物质。

3. 静置时间

多数实验室在对培养基进行灭菌后，会将其放置于水浴或烘箱中，使用时直接取出倾注。但需要注意的是，静置时间不应超过4小时，长时间静置可能导致琼脂少量凝固，形成絮状析出物。

4. 平板准备

在倒皿之前，平板应保持在35℃-40℃的温度。如果需进行表面接种，冷凝水可能导致菌落蔓延。在这种情况下，可以将平板放在具备空气对流的无菌净化台上吹干培养基表面，但需注意不能过度干燥，以免在培养过程中平板出现裂缝。

5. 倾注量

每个平板的倾注量一般在18-20mL。如果培养时间超过48小时或培养温度高于40℃，为了防止水分过快蒸发导致平板开裂，建议倾注量增至25mL左右。

6. 避免气泡

在倾注平板时，应尽量贴近平皿壁慢慢倾倒，以将气泡留在瓶底。如果平板中出现少量气泡，可以轻轻摇动使其移至平板壁上，这不会影响结果的观察。

7. 混合均匀

在每个平板中加入10mL融化的琼脂培养基后，迅速进行往复摇动和转圈晃动5-15次，以确保培养基与接种物充分混合。

8. 培养

待平板冷却后，翻转并置于适当的温度下进行培养。

在整个操作过程中，保持无菌状态至关重要。在使用之前，应将装有培养基的瓶或试管轻轻摇动，然后放入滚水浴或蒸汽浴中进行溶解，注意避免培养基过热而变质。对于消毒后的培养皿，其数量应比检测样品多出一个以做空白对照。

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